Der Computerentwickler Roger Dearley zieht mit seiner Frau Anita, der Haushälterin Nanny und ihren 101 Dalmatinern aus der Großstadt in einen Bauernhof auf dem Land. In ihrer direkten Nachbarschaft wohnt Cruella de Vil mit ihrem Frettchen Scorch in einer alten Villa. Cruella ist die Chefin des Modekonzerns, für den Anita arbeitet, und versucht den Hof der Dearlys zu ergattern. Ihre Machenschaften werden dabei meistens von ihren Handlangern Horace und Jasper ausgeführt.
Die drei kleinen Dalmatiner Lucky, Goliath und Rolly gehören zu den 101 Hunden auf dem Hof. Sie freunden sich mit den anderen Tieren an, besonders mit dem jungen Huhn Spot. Die vier erleben verschiedene Abenteuer auf und rund um den Bauernhof und vereiteln dabei Cruellas Pläne.